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高效液相色譜儀操作過程及注意事項(xiàng)

2014-12-20 [3455]
高效液相色譜儀操作過程及注意事項(xiàng)

高效液相色譜儀操作是應(yīng)注意什么: 
1、液相色譜儀的流動(dòng)相應(yīng)采用色譜純?nèi)軇?,以滿足要求、避免損壞色譜柱

2、待分析的樣品必須徹底溶解澄清、過濾,以避免堵塞、損壞色譜柱; 

3、液相色譜儀流動(dòng)相需經(jīng)過濾、除氣后方可使用; 

4、嚴(yán)禁使用有污染的水等沖洗色譜柱,避免將互不相溶的溶劑一同進(jìn)入泵內(nèi); 

5、液相色譜儀分析完成后,須注意及時(shí)清洗色譜柱和檢測(cè)器的比色池。 

高效液相色譜儀的操作過程如下: 

1.翻開HPLC工作站(包含計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀),銜接好活動(dòng)相管道,銜接檢測(cè)體系。 

2.對(duì)抽濾后的活動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。 

3.過濾活動(dòng)相,根據(jù)需求挑選不一樣的濾膜。 

4進(jìn)入HPLC操控界面主菜單,點(diǎn)擊manual,進(jìn)入手動(dòng)菜單。 

5.有一段時(shí)刻沒用,或許換了新的活動(dòng)相,需求先沖刷泵和進(jìn)樣閥。沖刷泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖刷進(jìn)樣閥,需求在manual菜單下,先點(diǎn)擊purge,再點(diǎn)擊start,沖刷時(shí)速度不要超越10ml/min。 

6.調(diào)理流量,初度運(yùn)用新的活動(dòng)相,能夠先試一下壓力,流速越大,壓力越大,通常不要超越2000。點(diǎn)擊injure,選用適宜的流速,點(diǎn)擊on,走基線,調(diào)查基線的狀況。 

7.規(guī)劃走樣辦法。點(diǎn)擊file,選擇select?users?and?methods,能夠選擇現(xiàn)有的各種走樣辦法。若需樹立一個(gè)新的辦法,點(diǎn)擊new?method。選擇需求的配件,包含進(jìn)樣閥,泵,檢測(cè)器等,根據(jù)需求而不一樣。選完后,點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣辦法需求包含:a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流,通常2-5分鐘;b.基線歸零;c.進(jìn)樣閥的loading-inject變換;d.走樣時(shí)刻,隨不一樣的樣品而不一樣。 

8.進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣辦法,點(diǎn)擊start。進(jìn)樣,一切的樣品均需過濾。辦法走完后,點(diǎn)擊postrun,可記載數(shù)據(jù)和做符號(hào)等。悉數(shù)樣品走完后,再用上面的辦法走一段基線,洗掉剩余物。 

9關(guān)機(jī)時(shí),先關(guān)計(jì)算機(jī),再關(guān)液相色譜儀。 
 

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